層析冷柜在重組磷脂酶C的改性應用

      層析冷柜在重組磷脂酶C的改性應用，其有特點就在于：涉及到有以下流程：

      1、突顯劑SS?mPEG的制法：向燒瓶添(tian)加進2g氧(yang)分子量為5000的單甲(jia)氧(yang)基(ji)聚乙(yi)二(er)(er)醇mPEG，多(duo)加進4mLN，N?二(er)(er)甲(jia)基(ji)甲(jia)酰(xian)胺(an)(an)，多(duo)方面(mian)溶于(yu)(yu)度；繼而加進0.12g丁(ding)二(er)(er)酸酐，封口混勻，于(yu)(yu)100℃邊絞拌邊加溫3h；待發(fa)應(ying)物(wu)待冷卻后于(yu)(yu)層(ceng)析(xi)陳列柜中逐加入到(dao)適量進10mL乙(yi)醚，將(jiang)所(suo)得額(e)稅(shui)奠定(ding)過(guo)(guo)慮干(gan)(gan)(gan)澀處理(li)；干(gan)(gan)(gan)澀處理(li)后的奠定(ding)用(yong)二(er)(er)氯甲(jia)烷氣體復溶，在(zai)用(yong)乙(yi)醚奠定(ding)，按順序四(si)五(wu)次；所(suo)得額(e)稅(shui)奠定(ding)生成(cheng)物(wu)抽真(zhen)空干(gan)(gan)(gan)澀處理(li)，在(zai)干(gan)(gan)(gan)澀處理(li)器中導出自(zi)備(bei)；將(jiang)上面(mian)終生成(cheng)物(wu)溶于(yu)(yu)4mL N，N?二(er)(er)甲(jia)基(ji)甲(jia)酰(xian)胺(an)(an)，加進0.46g N?羥基(ji)琥鉑酰(xian)亞胺(an)(an)和0.825g二(er)(er)環己基(ji)碳二(er)(er)亞胺(an)(an)，30℃溶于(yu)(yu)度過(guo)(guo)夜，將(jiang)發(fa)應(ying)生成(cheng)物(wu)放(fang)置到(dao)層析冷藏冰柜中冷卻塔至0℃，逐加入(ru)適(shi)量入(ru)40mL乙(yi)醚(mi)，將所得稅(shui)率結晶篩選(xuan)干澀(se)；干澀(se)后的結晶用(yong)(yong)二(er)氯(lv)甲(jia)烷(wan)氣體復(fu)溶，在用(yong)(yong)乙(yi)醚(mi)結晶，多(duo)次兩次；終結晶生成物既為活(huo)性的聚(ju)乙(yi)二(er)醇，將其干澀(se)，預備；

      2、裝飾酶(mei)(mei)的制(zhi)(zhi)法：將SS?mPEG和磷脂酶(mei)(mei)C按0～30的摩爾比例圖(tu)分解于大小為10mL，pH為7.2，滲透壓為25mM的Tris?HCl加載液(ye)中，在在常(chang)溫下自激(ji)振蕩化學反(fan)應一(yi)定程(cheng)度時光(guang)，用透析袋4℃透析過(guo)夜，所得額的裝飾酶(mei)(mei)液(ye)制(zhi)(zhi)冷吹干儲備用。