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超低溫保存箱在捕食螨雄螨精子制作的應用

    超低溫保存箱也稱為超低溫冰箱,一般應用于實驗室標本的制作及樣品的凍存,其在捕食螨雄螨精子制作的應用:
(1)交配中雌雄螨的獲取:從捕食螨飼養種群內,挑出捕食螨的卵單獨飼養至成螨后進行雌雄螨配對,配對10分鐘左右雌雄螨即可交配,從而獲得交配中雌雄螨;

(2)交配中雌雄螨的定型:在捕食螨交配后0-120分鐘內,將正處在交配過程中的雌雄個體連同飼養裝置一起放置于-80℃超低溫保存箱或液氮中3-5分鐘,進行雌雄螨定型;

(3)成形(xing)后雌雄螨(man)的(de)分離(li)出(chu)來:成形(xing)后將雌雄螨(man)連到喂養器在一塊取(qu)下(xia),再換細毛筆(bi)從喂養器里將雜(za)交的(de)雌雄螨(man)挑入載玻片上,再利(li)用率0號(hao)蟲類針和細毛筆(bi)等(deng)方法(fa)將雜(za)交的(de)雌雄螨(man)猛地離(li)婚(hun),制(zhi)止破碎(sui)精包;

(4)精(jing)(jing)包(bao)的榮獲(huo):雌雄(xiong)螨實現目標分開(kai)用后,使用微創手術刀(dao)將(jiang)(jiang)雄(xiong)螨的鄂體切下來(lai)來(lai),繼承顎體,在顎體上(shang)很會通(tong)過觀(guan)察出去于導精(jing)(jing)趾上(shang)邊的精(jing)(jing)包(bao),那么用細毛筆尖將(jiang)(jiang)精(jing)(jing)包(bao)輕挑(tiao)拿掉倒進70%-100%酒水內(nei)保(bao)管或直接的使用;

(5)精(jing)(jing)子的(de)(de)提(ti)高及玻片(pian)(pian)瘧原蟲(chong)備(bei)制:用膠頭(tou)滴(di)(di)管滴(di)(di)入滴(di)(di)下0.075mol/L的(de)(de)氯化(hua)鉀(jia)硫酸(suan)銅懸濁(zhuo)液(ye)于載(zai)玻片(pian)(pian)的(de)(de)中(zhong)間地點,第二步用0號(hao)細(xi)毛筆(bi)將(jiang)捕(bu)獵(lie)螨精(jing)(jing)包(bao)安置于載(zai)玻片(pian)(pian)上(shang)(shang)(shang)的(de)(de)氯化(hua)鉀(jia)硫酸(suan)銅懸濁(zhuo)液(ye)中(zhong),低溫狀(zhuang)態下安置3015分(fen)(fen)(fen)的(de)(de)時(shi)間,用移液(ye)槍或膠頭(tou)滴(di)(di)管將(jiang)氯化(hua)鉀(jia)硫酸(suan)銅懸濁(zhuo)液(ye)吸引(yin)或將(jiang)精(jing)(jing)包(bao)用細(xi)毛筆(bi)更(geng)換到(dao)新(xin)(xin)的(de)(de)載(zai)玻片(pian)(pian)上(shang)(shang)(shang),用0號(hao)害蟲(chong)針或更(geng)細(xi)的(de)(de)針狀(zhuang)設(she)備(bei)將(jiang)精(jing)(jing)包(bao)悄悄弄破,并迅速的(de)(de)往(wang)(wang)(wang)載(zai)玻片(pian)(pian)上(shang)(shang)(shang)滴(di)(di)入滴(di)(di)下新(xin)(xin)配(pei)置單的(de)(de)開展(zhan)(zhan)(zhan)確(que)(que)(que)定(ding)的(de)(de)液(ye)(甲(jia)醇:冰醋酸(suan)鈉=3:1),開展(zhan)(zhan)(zhan)確(que)(que)(que)定(ding)的(de)(de)3015分(fen)(fen)(fen)的(de)(de)時(shi)間,在這個的(de)(de)過程 中(zhong)通常(chang)添加中(zhong)滴(di)(di)加3次(ci)開展(zhan)(zhan)(zhan)確(que)(que)(que)定(ding)的(de)(de)液(ye)(畢竟開展(zhan)(zhan)(zhan)確(que)(que)(que)定(ding)的(de)(de)液(ye)蒸發速快(kuai)快(kuai)),待開展(zhan)(zhan)(zhan)確(que)(que)(que)定(ding)的(de)(de)液(ye)空(kong)氣(qi)變(bian)干后,往(wang)(wang)(wang)載(zai)玻片(pian)(pian)上(shang)(shang)(shang)滴(di)(di)入吉姆(mu)薩染(ran)液(ye)(原液(ye)1份(fen),PH=7.2的(de)(de)磷酸(suan)降(jiang)低液(ye)9份(fen)溶解(jie)),低溫狀(zhuang)態下染(ran)色的(de)(de)6015分(fen)(fen)(fen)的(de)(de)時(shi)間,最好用只用清水(shui)將(jiang)染(ran)液(ye)沖泡掉,經自(zi)然生(sheng)態空(kong)氣(qi)變(bian)干或用電引(yin)風(feng)機電機吹(chui)頭(tou)后,往(wang)(wang)(wang)載(zai)玻片(pian)(pian)上(shang)(shang)(shang)被(bei)被(bei)染(ran)色的(de)(de)地點上(shang)(shang)(shang)述滴(di)(di)入滴(di)(di)下優(you)巴拉爾(er),第二步扣上(shang)(shang)(shang)蓋(gai)玻片(pian)(pian),互用符號(hao)筆(bi)對被(bei)染(ran)色的(de)(de)連接開展(zhan)(zhan)(zhan)圈注以更(geng)方(fang)便(bian)分(fen)(fen)(fen)析,待供試品開展(zhan)(zhan)(zhan)確(que)(que)(que)定(ding)的(de)(de)好后在光學儀器體視(shi)顯微鏡下就(jiu)可分(fen)(fen)(fen)析捕(bu)獵(lie)螨雄螨精(jing)(jing)子。

 

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