低溫洗衣機和程控波特率冰凍儀在神經細胞凍存的操作使用步驟之一

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冷藏冰箱保鮮和程控傳輸速度冷卻儀在血細胞凍存的操作方法流程:

1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;
2. 取對數生長期的細胞,用胰蛋白酶把單層生長的細胞消化下來,懸浮生長的細胞則直接將細胞移至15ml離心管中;
3. 離心1000rpm,5min;
4. 去除胰蛋白酶及舊的培養液,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
5. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
6. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
7. 凍存:①采取已確定過程的,基準的凍存過程為減溫傳送速度-1~-2℃/ min;當熱度達-25℃之下時,可升至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可快速發展浸泡液氮中。②也可將配有細胞系的凍存管加進-20℃2h ,并且加進-70℃中包夜,存入凍存管,移入液氮貯槽內。


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