用于真空冷凍菌種保藏的安培管宜采用中性玻璃制造，形狀可用長頸球形底的，亦稱淚滴型安培管。大小要求外徑6～7.5mm，長105 mm，球部直徑9～11 mm，壁厚0.6～1.2 mm，也可用沒有球部的管狀安培管。塞好棉塞，在壓力0.11MPa，溫度121℃條件下滅菌30min后備用。
②準備菌種(zhong) 

   用真空冷凍干燥法保藏的菌種保藏期可長達幾年甚至幾十年，為了不出現差錯，所用菌種純度要高，而且菌齡要適宜。細菌和酵母菌的菌齡要求超過對數生長期，若用對數生長期的菌種進行保藏，其存活期反而降低。一般細菌的菌齡要求24～48h；酵母菌為3d；形成孢子的微生物則宜保藏孢子；放線菌和絲狀真菌菌齡為7～10d。

   以細菌斜面為例，用脫脂牛乳2mL左右加入試管中，制成濃菌液，每支安培管分裝0.2mL。
④冷凍 

   此處介紹的是簡易的方法與裝置，可達到同樣的目的。
   將分裝好的安培管放中凍結，無低溫冰箱可用冷凍劑如干冰（固體CO2）酒精液或干冰丙酮液，溫度可達－70℃。將安培管插入冷凍劑，只需冷凍幾分鐘，即可使懸液結冰。
⑤真空干燥(zao) 

   抽真空干燥后，取出安培瓶，接在封口用的玻璃管上，可用L形五通管繼續抽氣，約10min即可達到26.7Pa（0.2mmHg）。于真空狀態下，以煤氣噴燈的細火焰在安培管頸中央進行封口。封口以后，保存于冰箱或室溫暗處。
   此法(fa)為菌(jun)(jun)種保(bao)(bao)藏方法(fa)中(zhong)最有效的(de)方法(fa)之一，對(dui)一般生(sheng)活力(li)強的(de)微生(sheng)物及(ji)其(qi)孢(bao)子都適用(yong)，即使對(dui)一些很難保(bao)(bao)存(cun)的(de)致病菌(jun)(jun)，如腦膜炎球與淋病球菌(jun)(jun)等(deng)亦能(neng)保(bao)(bao)存(cun)。此法(fa)適用(yong)于菌(jun)(jun)種的(de)長期保(bao)(bao)存(cun)，一般可保(bao)(bao)存(cun)數(shu)年至幾十年。

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