田楓凍干機：微生物菌種如何真空冷凍干燥保存

田楓：微生態學菌株怎么才能真空體冰凍空氣干燥存為？步奏詳細：①提供安培管

用于真空冷凍菌種保藏的安培管宜采用中性玻璃制造，形狀可用長頸球形底的，亦稱淚滴型安培管。大小要求外徑6～7.5mm，長105 mm，球部直徑9～11 mm，壁厚0.6～1.2 mm，也可用沒有球部的管狀安培管。塞好棉塞，在壓力0.11MPa，溫度121℃條件下滅菌30min后備用。
②準(zhun)備(bei)菌(jun)種

用真空冷凍干燥法保藏的菌種保藏期可長達幾年甚至幾十年，為了不出現差錯，所用菌種純度要高，而且菌齡要適宜。細菌和酵母菌的菌齡要求超過對數生長期，若用對數生長期的菌種進行保藏，其存活期反而降低。一般細菌的菌齡要求24～48h；酵母菌為3d；形成孢子的微生物則宜保藏孢子；放線菌和絲狀真菌菌齡為7～10d。

③備制菌懸液與散裝

以細菌斜面為例，用脫脂牛乳2mL左右加入試管中，制成濃菌液，每支安培管分裝0.2mL。
④冷凍

菌群學茵種用，昆明田楓有成套電氣的保護裝置買賣，可單獨性負壓制冷干熱（單獨性在凍干機內原位干熱，④和⑤關鍵步驟結合起來）。

此處介紹的是簡易的方法與裝置，可達到同樣的目的。
將分裝好的安培管放中凍結，無低溫冰箱可用冷凍劑如干冰（固體CO2）酒精液或干冰丙酮液，溫度可達－70℃。將安培管插入冷凍劑，只需冷凍幾分鐘，即可使懸液結冰。
⑤真空干燥

為在負壓干躁時使試品控制凍結銀行卡情形，需準備好冰凍槽，槽體內放碎冰和加碘食鹽，分層勻，可冷至－15℃。安培瓶冰凍槽的干躁瓶內。

凍干機

⑥抽氣基本若在30min內能夠達成93.3Pa（0.7mmHg）負壓度時，則低溫低溫干燥處理物而致融解，后面持續抽氣，幾小時左右內，人的眼睛不錯的察到被低溫低溫干燥處理物以趨低溫低溫干燥處理，基本抽出負壓度26.7Pa（0.2mmHg），持續壓6~7h即刻。⑦封口處

抽真空干燥后，取出安培瓶，接在封口用的玻璃管上，可用L形五通管繼續抽氣，約10min即可達到26.7Pa（0.2mmHg）。于真空狀態下，以煤氣噴燈的細火焰在安培管頸中央進行封口。封口以后，保存于冰箱或室溫暗處。
此法(fa)為菌種保藏方法(fa)中(zhong)最有效的方法(fa)之(zhi)一(yi)(yi)，對一(yi)(yi)般生(sheng)(sheng)活力強(qiang)的微生(sheng)(sheng)物及其孢子都適用，即(ji)使對一(yi)(yi)些很難保存(cun)(cun)的致病菌，如腦膜炎球與(yu)淋病球菌等亦(yi)能(neng)保存(cun)(cun)。此法(fa)適用于菌種的長期保存(cun)(cun)，一(yi)(yi)般可(ke)保存(cun)(cun)數年(nian)(nian)至幾十年(nian)(nian)。

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